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液相色谱仪的用处及3大系统

点击次数:838 发布时间:2017-02-20

  液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)••。现代液相色谱仪由高压输液泵¶••⊿进样系统¶••⊿温度把持系统¶••⊿色谱柱¶••⊿检测器¶••⊿信号记载系统等部分组成••。与经典液相柱色谱装置比较,具有¶••⊿快速¶••⊿敏锐等特点••。对高沸点¶••⊿难气化合物的混杂物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分别••。利用于生物化学¶••⊿生物医学¶••⊿环境化学¶••⊿石油化工等部门••。

  液相色谱仪3大系统

  系统由储液器¶••⊿泵¶••⊿进样器¶••⊿色谱柱¶••⊿检测器¶••⊿记载仪等几部分组成••。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过重复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分别成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记载仪,数据以图谱情势打印出来液相色谱仪重要有进样系统¶••⊿输液系统¶••⊿分别系统¶••⊿检测系统和数据处理系统,下面将分辨叙述其各自的组成与特点••。

  1.进样系统

  液相色谱仪一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的••。这对进步分析样品的重复性是有益的••。

  2.输液系统

  该系统包含高压泵¶••⊿流动相贮存器和梯度仪三部分••。高压泵的一般压强为l.47~4.4X10Pa,流速可调且稳固,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对进步分辨率¶••⊿回收样品¶••⊿保持样品的生物活性等都是有利的••。流动相贮存器和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而转变,包含转变洗脱液的极性¶••⊿离子强度¶••⊿PH值,或改用竞争性克制剂或变性剂等••。这就可使各种物质(即使仅有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分别••。

  3••。分别系统

极速牛牛  该系统包含色谱柱¶••⊿连吸收和恒温器等••。色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连吸收),内径为2~5mm,由"不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如硅胶表面的硅酸基因基础已除去)¶••⊿多孔性(孔径可达1000?)和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样),或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基¶••⊿季胺基¶••⊿羟甲基¶••⊿苯基¶••⊿氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物••。因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性••。例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝聚素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分别出来••。另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀¶••⊿致密状态,极易降低涡流扩散效应••。基质粒度小,微孔浅,样品在微孔区内传质短••。这些对缩小谱带宽度¶••⊿进步分辨率是有益的••。根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大••。这也进一步证明基质粒度小,会进步分辨率的道理••。再者,液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C,通过改良传质速度,缩短分析时间,就可增长层析柱的效率••。

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